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咱们查阅了一些“高致病弧菌”的国表里文件

发布日期:2024-06-28 23:47    点击次数:106

咱们查阅了一些“高致病弧菌”的国表里文件

对于高致病弧菌琳琅满见识称号与简称:

- TPD全称Translucent Post-Larva Disease,直译为半透明幼体病;

- GPD全称Glass Post-larvae Disease直译为玻璃幼体病;

- BVS全称Bacterial Vitrified Syndrome,直译为细菌性玻化详细症;

- HLVD全称Highly Lethal Vibrio Disease,直译为高致病弧菌病。

高致病弧菌最早于2019年底、2020岁首运行在中国流行,该病一般出目下放苗前期,衍生户通过虾苗的症状将其称为玻璃苗,目下海外期刊上发表的干系著作基本王人来自中国内行学者,TPD、GPD、BVS是基于症状对该病作念的不同翻译与英文定名。后续的筹议标明该疾病是由特异性的副溶血弧菌导致的,它的致病性要远强于AHPND弧菌,因为将这类弧菌定名为高致病弧菌以示区别,其激发的疾病叫作念高致病弧菌病HLVD;也有内行分离出不属于副溶血弧菌的致病菌。

1. Determination of the Infectious Agent of Translucent Post-Larva Disease (TPD) in Penaeus vannameiYing Zou等,Pathogens,2020作家团队在2020年4月28日在江苏Ganyu取样TPD对虾,进行已知病原筛查,恶果标明这是一种新的细菌性病原;然后在细菌分离和轻薄、攻毒实验和组织病理学分析的基础上,对引起TPD的潜在病原进行了系统探听。

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图一、感染TPD幼体的临床施展

a. 聚积自TPD感染水池的幼体 b.  采自浸泡式攻毒的个体

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图二、细菌轻薄与毒力基因分析

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图三、当然感染TPD的幼体切片

a、b、e为感染初期病理变化,c、d、f为急性感染期的病理变化;a、b、c、d为肝胰腺,e、f为中肠;BC bacterial colonization细菌定值

临床症状:病虾的肝胰酶和消化说念变得惨白、无色。

病原菌Vp-JS20200428004-2为一种Vibrio parahaemolyticus副溶血弧菌。

与典型的Acute hepatopancreatic necrosis disease致病副溶血弧菌不同,Vp-JS20200428004-2含有ldh基因会产生热溶血素,而枯竭pirAVp和pirBVp基因。

组织病理学:该病原菌会变成对虾虾肝胰腺和中肠上皮细胞严重坏死和零散。

1.83×106CFU/mL的剂量40h即变成100%死字。

2. 凡纳滨对虾虾苗细菌性玻化症 (BVS) 的病原、病理分析玉玺庚等,水产学报,2021作家团队自河北省沧州市 5 家对虾育苗场接管具有典型的“玻化症” 的患病虾苗,然后进行病样查验及上风菌分离、东说念主工感染、病原菌分类轻薄、 组织病理学不雅察和药物敏锐性实验。

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图一、 凡纳滨对虾虾苗细菌性玻化症症状及菌株 Lv-A 和 Lv-B 的口头不雅察

患病对虾口头特征:患病凡纳滨对虾虾苗施展为活力平缓,虾 体孱羸、暗浊,空肠空胃,肝胰腺轮廓暗昧、 组织解体、面孔变浅至肝胰腺区由宽泛的足够褐色组织变为空缺的玻璃化气象。头胸甲区域至腹部呈现瘦小、暗浊气象。

通过相比筛选共分离出2株上风菌,东说念主工感染实验Lv-A和Lv-B组诀别在12h和24h出现执续性玻璃化表象。

病原菌16S rDNA和gyrB轻薄分析,不同才能与数据库得到的恶果存在各异,本实验暂无法服气Lv-A和Lv-B的具体菌株称号。

组织病理学特征:石蜡组织切片标明,患病凡纳滨对虾虾苗肝胰腺萎缩,肝小管上皮细胞坏死、零散,肝小管中充斥多半的碎屑组织并迟缓褐化、黑化;肠说念内充盈多半的褐化组织碎屑,绒毛膜零散、隐没,肠壁出现缺失表象。

药敏熟练:Lv-A和Lv-B均对米诺环素、多西环素、萘啶酸敏锐,对新霉素、吡哌酸、乙酰螺旋霉素、链霉素、利福平、复方新诺明耐药。

3. Highly lethal Vibrio parahaemolyticus strains cause acute mortality in Penaeus vannamei post-larvae

Feng Yang等,Aquaculture,2022

“在这项筹议中,咱们探听了这种新出现疾病的病因。从不同衍生场(福建,2019年10月24日、2020年5月9日和2020年6月11日)汇集的患病动物身上分离出了三种高致死率的副溶血性弧菌菌株,并证明它们是致病菌。此外,咱们还发现病理变化很可能是由细菌毒素引起的。”

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图一、患病幼体的临床症状

从不一样本获得的致病菌菌株诀别为vp-HL-201910, vp-HL-202005和vp-HL-202006,16S rRNA基因序列BLAS分析标明,这些菌落均属于弧菌属,与副溶血性弧菌的相似性最高;诈欺保守基因tlh进行的进一步系统进化分析标明分离到的菌落与3株已知的副溶血性弧菌同组。是以将这种病再行定名为Highly Lethal Vibrio Disease。

HLVD和AHPND的临床症状相似,但高致病弧菌莫得pirAvp和pirBvp以及 AP1和AP2基因。

组织学病变:肝胰腺小管上皮细胞出现严重的坏死和零散;中肠上皮细胞的结构也发生了权贵的变化;偶然可在肝胰腺和中肠看到定植细菌。

HLVD菌株的毒力比AHPND菌株高1000倍。

HLVD的病理学是由一种细菌毒素引起的。

4. Vibrio parahaemolyticus becomes lethal to post-larvae shrimp via acquiring novel virulence factorsShuang Liu等,Microbiology spectrum,2023“作家团队领先通过攻毒测试实验,筹议了导致VpTPD对凡纳滨对虾幼体致病性的不同分子量的要害致病卵白。然后,通过质谱分析和基因组测序敌手脚 VpTPD 潜在致病因子的致病卵白片断进行了表征。同期,还筹议了不同弧菌分离物中高毒卵白(VHVP)毒力因子的存在情况,以偏激在不同地区对虾衍生场 TPD 病例中的出现情况。”

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图一、质粒2中vhvp-1和vhvp-2所编码卵白质的推导保守结构域

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图二、不同对虾衍生区域的VpTPD流行率

VpTPD 的高效毒力因子应存在于通过超声波龙套VpTPD U索求的裂解卵白质部分(MW>100kDa)中。

在给与 VpTPD U(>100kDa)攻毒的组别中,肝胰腺小管和中肠的上皮细胞在挑战后16和24 h出现轻度坏死和零散,在挑战后32和40 h出现严重坏死和零散;中肠的组织病理学变化在攻毒32h后最为严重,严重的上皮细胞坏死导致中肠基底膜上的上皮细胞零散并洒落到中肠腔内。

通过基因组测序对比VpTPD与非VpTPD组,VpTPD有2个环状染色体,3个质粒;非VpTPD株(Vp1616) 只消两个环状染色体。两个推定毒力因子基因(GE005140和GE005139)只存在VpTPD中,它们编码推导出的假设毒力因子VHVP-1和VHVP-2与杀虫毒素卵白的氨基酸序列具有100%和99.49%的交流性。

新式毒素卵白VHVP-2,(分子量大于100kDa)含有梵衲氏菌毒力质粒卵白、杀虫毒素复合卵白和神经氨酸酶的保守结构域,是VpTPD的要害毒力因子。

5. Vibrio parahaemolyticus becomes highly virulent by producing Tc toxins

Feng Yang等,Aquaculture,2023

“在本筹议中,咱们相比了VpHLVD和非HLVD致病弧菌菌株的卵白质谱,并发现了VpHLVD特异抒发的新式Tc毒素。咱们证明Tc毒素是VpHLVD的主要毒力决定要素。这是初次证明Tc毒素对弧菌毒力的孝敬。”

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图一、致病弧菌和非致病弧菌菌株卵白质谱的相比

除VpHLVD菌株特异抒发的两条高分子量卵白条带(约300kDa和约200kDa)外,系数测试的副溶血性弧菌菌株的卵白质粗略相似。通过分离、攻毒等实验标明VpHLVD特异性 ~300 kDa 和 ~200 kDa 卵白可能是与HLVD干系的毒素,它们不由细菌分泌。

Tc毒素基因只在VpHLVD菌株中抒发(相对 AHPND菌株)。

VpHLVD包含两组质粒编码的Tc毒素基因。

Tc毒素基因只在VpHLVD菌株中抒发。

排斥Tc毒素编码质粒可排斥VpHLVD致HLVD的能力。

6. Prevalence investigation of translucent post-larvae disease (TPD) in ChinaTianchang Jia等,Aquaculture,2024“从2021年到2022年,咱们对从中国不同省份聚积的对虾中可能导致 TPD 感染的细菌病原体进行了分离、轻薄和致病性分析,以了解该病原体的基本生物学特质。同期,为了服气该病在中国主要对虾衍生品种和不同对虾衍生区域的流行情况,本筹议基于分子生物学分析(PCR 和及时 PCR)和组织病理学分析,对 2021 年至 2022 年的 TPD 进行了分子流行病学探听。”

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图一、南好意思白对虾幼体感染VpHLVD临床症状 & VpHLVD感染组不同感染阶段的南好意思白对虾幼体肝胰腺和肠的组织病理学相片

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图二、VpHLVD分子流行病学探听

在感染的早期,肝胰管和中肠的上皮细胞轻飞动散,而况细菌在腔内积蓄;在中期,肝胰管和中肠的上皮细胞出现严重坏死和部分零散;在晚期,肝胰管和中肠组织出现严重坏死和零散,多半细菌定植在腔内。

本筹议阐发了3株TPD致病菌,轻薄菌株20220614001-2属于需钠弧菌V. natriegens,菌株20220614004-1归类于副溶血弧菌V. parahaemolyticus,菌株20220614009-1归类于坎贝氏弧菌V. campbellii。

在大多数沿海省份的衍生水池中王人发现了VTPD阳性样本,南好意思白对虾的阳性率为29.1%(135/463),日本对虾的阳性率为18.3%(11/60)。罗氏沼虾和克氏原鳌虾未见阳性恶果。此外,鱿鱼和沙蚕中VTPD的阳性率为22.9%(14/61),而螺蛳(野生)中未见阳性恶果。

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